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电激作用引起的嗜热链球菌的遗传转化

刘世珍;   

  • 出版日期:1988-01-31 发布日期:1988-01-31

  • Published:1988-01-31 Online:1988-01-31

摘要: <正> 至今还没有适于嗜热链球菌的转化系统,并且也难以使该菌的原生质体再生。因此,对电激法作为另一种把 DNA 引入该菌的转移方法作了试验。把对数中期的嗜热链球菌悬浮在含有0.3M棉子糖、7 mM 磷酸钾和1 mM 氯化镁的缓冲液(pH7.4)中,该液同时含有10μg的携带红霉素抗性标记的链球菌克隆载体 pV736的 DNA。在2000伏的电压下和4.5毫秒的时间内完成电激反应,然后将此细胞悬浮液在4℃下保持30分钟。接着把20μg/l 的红霉素沉积在乳糖琼脂培养基上。这种方法的转化水平不高(每μg DNA 约获得10个转化子),也不能

关键词: 嗜热链球菌:6645, 原生质体再生:3319, 红霉素:3311, 电激法:2700, 转化系统:2597, 转移方法:2083, 克隆载体:2068, 抗性标记:2028, 氯化镁:1979, 遗传转化:1776