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农杆菌介导玉米胚性愈伤的遗传转化研究

杨爱国;刘爽;赵琦;赵玉锦;张世煌;潘光堂;   

  1. 中国农业科学院作物科学研究所;首都师范大学;四川农业大学玉米研究所;
  • 出版日期:2008-08-26 发布日期:2008-08-26
  • 基金资助:
    农业部“引进国际先进农业科学技术”项目(2003-Q03);; 教育部长江学者和创新团队发展计划(IRTO453);; 四川省玉米生物技术“十五”攻关项目

  • Published:2008-08-26 Online:2008-08-26

摘要: 利用3种不同类型的农杆菌菌株C58、LBA4404和EHA105携带外源GUS基因分别侵染玉米自交系齐319和18(红)胚性愈伤。结果显示,不同的菌株和自交系间的搭配,其遗传转化效率差异很大,GUS瞬时表达率呈极显着差异(F=24.92**),抗性愈伤率也呈极显着差异(F=19.43**)。其中,EHA105-齐319组合遗传转化效率最高,其GUS瞬时表达率平均为55.5%,最高可达71.1%;其抗性愈伤率平均为14.4%,最高可达20%;对22株转基因T0代抗性植株进行PCR检测,其中PCR呈阳性植株有11株,阳性率为50%。进一步对此22株T0代抗性植株进行叶片组织化学染色分析,结果显示,PCR呈阳性的植株中均有GUS基因表达。从而证明,外源GUS基因在转基因玉米T0代植株中得到稳定表达,而且验证了PCR检测结果和GUS表达分析结果的一致性。

关键词: 农杆菌菌株, 基因型, 玉米愈伤, 转化率