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河套蜜瓜花粉管通道法转化hALR基因

张立全;哈斯阿古拉;扈廷茂;刘明秋;   

  1. 内蒙古大学生命科学学院生物工程中心内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室;
  • 出版日期:2009-03-26 发布日期:2009-03-26
  • 基金资助:
    内蒙古自然科学基金项目(200208020307)

  • Published:2009-03-26 Online:2009-03-26

摘要: 为利用河套蜜瓜为生物反应器生产可用于治疗肝病的蛋白因子,以人胎肝mRNA为模板,经RT-PCR扩增获得了471 bp cDNA片段。克隆到pMD18-T载体,命名为pMD-ALR,测序分析结果与GenBank中报道的hALR编码序列完全相同。酶切回收hALR片段,插入到含有甜瓜果实黄瓜素(Cucumisin)基因启动子的果实特异性表达载体pPZP-CGN中,构建了hALR甜瓜果实特异性表达载体pPZP-CAN。花粉管通道法转化试验大田自花授粉花63朵,收获T0代果实27颗,结实率为42.9%。提取T0代种子无菌苗DNA,经PCR、PCR-southern和斑点杂交检测有13株呈阳性。

关键词: 人肝再生增强因子, 果实特异性, 花粉管通道法, 河套蜜瓜