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甘菊cDNA-AFLP反应体系的优化

黄河;王顺利;曹华雯;戴思兰;   

  1. 北京林业大学园林学院;北京农学院城乡发展学院;
  • 出版日期:2009-11-26 发布日期:2009-11-26
  • 基金资助:
    国家高技术研究发展计划(“863”计划)重点项目(2007AA021403)

  • Published:2009-11-26 Online:2009-11-26

摘要: 以甘菊为试验材料,研究了影响cDNA-AFLP反应体系的几个关键因素,建立了适宜甘菊的cDNA-AFLP分析体系,并得到了清晰可辨的cDNA-AFLP指纹图谱。结果表明:适用于甘菊叶片总RNA提取的方法为改进的Trizol法;酶切连接采用一步法,dscDNA酶切用量为300ng,酶切连接时间为8h;PCR选择性扩增反应时,反应体系中最佳组合为:引物浓度0.4mM、Mg2+浓度1.25mM、Taq酶浓度0.9U、dNTP浓度0.3mM。

关键词: 甘菊, cDNA-AFLP, 反应体系优化