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三角帆蚌Nacrein基因克隆、蛋白提纯及其对珍珠晶体成型的影响

韩健;李文娟;施志仪;郝莹莹;靳雨丽;   

  1. 上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    上海市科委基础重大项目(06aj14003);; 上海市博士后科研资助计划面上项目(09R21413200);; 上海市重点学科水生生物学建设项目(S3070)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 为研究三角帆蚌Nacrein蛋白对珍珠晶体成型的影响,通过巢式及3′-RACE PCR对三角帆蚌基质蛋白Nacrein基因3′端序列进行克隆,得到850bp碱基片段,分析表明其与合浦珠母贝同源基因序列相似度为56%,与马氏珠母贝相似度为50%。试验通过水提法初步分离出珍珠质水溶性基质蛋白,并采用快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography,FPLC)分离出分子量约为60kD的Nacrein蛋白。此外,采用配对试验设计,对试验组外套膜组织培养样品加入Nacrein蛋白,研究Nacrein蛋白对晶体成型的影响,结果显示,加入Nacrein蛋白的试验组结晶成棱形状;而未加Nacrein蛋白的对照组结晶成雪花状,而且在晶体形成的时间上,试验组也较之对照组要早。研究表明,Nacrein蛋白能加速外套膜组织分泌的钙质形成棱状结晶,从而对晶体成型产生影响。本研究为进一步研究基质蛋白对生物矿化的作用提供试验依据,对珍珠培育生产有一定指导意义。

关键词: Nacrein基因克隆, Nacrein基质蛋白, 珍珠, 晶体成型