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一种构建新型T载体的简便方法及应用

齐向辉;陈辉;沈琦;何晨曦;刘学;郭齐;陈华友;徐虹;   

  1. 江苏大学食品与生物工程学院;南京工业大学材料化学工程国家重点实验室;
  • 出版日期:2011-03-26 发布日期:2011-03-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(21006041);;江苏省博士后基金项目(0901012B);; 江苏大学高级专业人才科研资助项目(08JDG009),江苏大学科研立项项目(07A064)

  • Published:2011-03-26 Online:2011-03-26

摘要: T载体能够用于PCR产物的快速克隆且易于操作。以常用的克隆载体pGEM-3zf(+)为出发材料,将其进行改造为通用的T载体。通过一步反向PCR方法在该载体中插入带有Xcm I酶切位点的一段序列,在Xcm I酶的切割下产生两端含有T核苷酸的线型核苷酸序列,最终获得用于克隆PCR产物的T载体。外源基因xdh克隆试验表明该载体构建成功,此载体完全可以用于PCR产物的基因克隆试验,为相关载体的改造提供了思路。

关键词: T载体, 一步反向PCR, Xcm I