]*>","")" /> 玉米基因组DNA提取及浓度测定方法评价

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玉米基因组DNA提取及浓度测定方法评价

陈丽丽;张鹏;黄新;朱水芳;   

  1. 北京化工大学生命科学与技术学院;中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所;
  • 出版日期:2011-12-26 发布日期:2011-12-26
  • 基金资助:
    转基因重大专项课题(2011ZX08012-001,2009ZX08012-001B,2008BAK41B01-2)

  • Published:2011-12-26 Online:2011-12-26

摘要: 以非转基因玉米种子为材料,比较了常用的3种植物基因组DNA提取试剂盒及改良的CTAB法,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度及实时荧光PCR扩增检测,对提取得到的基因组DNA的纯度、得率及4种提取方法的重复性、提取时间进行分析;比较紫外分光光度法、Qubit荧光法、Pico Green荧光分光光度法,以实时荧光定量PCR检测结果为参照,对3种DNA浓度测定方法的准确性进行分析。结果显示,磁珠法(Promega)最适合应用于快速、简便、高效检测中的植物基因组DNA提取,能有效获得纯度高、完整性好的基因组DNA,并且磁珠法提取效率高,重复性好,提取时间短;在基因组DNA浓度测定中,紫外分光光度法、Qubit荧光法、Pico Green荧光分光光度法的相对误差分别为99.8%、49.8%和28.9%,表明Pico Green荧光分光光度法测定DNA浓度的准确度最高。

关键词: 基因组DNA, 提取效率, 浓度测定