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转hTNF-α基因在鱼腥藻中表达产物的提取及其初步纯化

牛黎莉;张芃芃;韩睿;冉亮;赵兴贵;宋东辉;邓元告;张越男;郭玉蓉;施定基;   

  1. 甘肃农业大学食品科学与工程学院,中国科学院植物研究所,天津科技大学海洋科学与工程学院,中国科学院植物研究所,天津科技大学海洋科学与工程学院,天津科技大学海洋科学与工程学院,天津科技大学海洋科学与工程学院,天津科技大学海洋科学与工程学院,甘肃农业大学食品科学与工程学院,天津科技大学海洋科学与工程学院 兰州730070,天津科技大学海洋科学与工程学院,天津300457,北京100093,天津300457,北京100093,天津300457,天津300457,天津300457,天津300457,兰州730070,天津300457,中国科学院植物研究所,北京100093
  • 出版日期:2006-04-26 发布日期:2006-04-26
  • 基金资助:
    天津市科委重点科技攻关项目(043182711)

  • Published:2006-04-26 Online:2006-04-26

摘要: 研究了转hTNF-α基因鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC 7120)中表达产物的最佳提取条件,并研究目标蛋白hTNF-α对温度耐受度和硫酸铵盐析的条件,对总蛋白和目标蛋白进行了检测。结果表明,hTNF-α的最佳溶出条件为:0.05 mol/L、pH7.5Tris-HCl缓冲液,NaCl的浓度为0.2 mol/L;当温度为55℃时,处理30min,其hTNF-α提取量下降不明显,回收率达到92.08%,可除去约40%的杂蛋白;先用饱和度为30%的硫酸铵沉淀杂蛋白,再用60%的硫酸铵沉淀目标蛋白,又可除去部分杂蛋白。

关键词: 人肿瘤坏死因子α, 鱼腥藻7120, 提取缓冲液, 温度处理, 硫酸铵沉淀处理