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基因诱变、重组、克隆

  

  • 出版日期:1993-07-26 发布日期:1993-07-26

  • Published:1993-07-26 Online:1993-07-26

摘要: <正> 932201用于酿酒酵母的多位点整合盒区[英]/Kudla,B.…//Gene.-1992,119(1).-49~56[译自 DBA,1993,12(2),93-00640]在该酵母基因组多个位点整合克隆的DNA所用的载体质粒为 pBK614。该载体含一个∑-序列,它在酵母基因组中有20~30个拷贝。载体的盒区含有嵌插着一个多克隆位点的341bp 的全长信号构件,从而可导入任何克隆的:DNA 片段。构件旁有限制性酶切点,可分离到不含外部序列的∑-嵌插的盒区。这些特点使具有∑-末端的 DNA 得以纯化。能很有效地对准酵母原有的∑-序列。由于成功的整合并未消除定靶性能,所以,靶序列的天然重复允许在一系列转化中对同一载体使用几次。有一定拷贝数的基因整合可用于蛋白的超量表达。 (郭殿

关键词: 多克隆位点:4420, 酿酒酵母:4317, 酵母基因组:3748, 靶序列:2797, 染色体:2691, 合成基因:2687, 大肠杆菌:2598, 限制性位点:2541, 拷贝数:2501, 基因整合:2450