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猕猴桃模板DNA的提取及RAPD-PCR最佳反应体系的建立

陈万秋;李思光;罗玉萍;陈少风   

  1. 南昌大学生物科学工程系,南昌大学生物科学工程系,南昌大学生物科学工程系,南昌大学生物科学工程系 南昌330047
  • 出版日期:2003-06-26 发布日期:2003-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目 ( 3 9960 0 0 7);; 江西省自然科学基金资助项目 ( 983 0 2 7)

  • Published:2003-06-26 Online:2003-06-26

摘要: 以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会影响扩增效果。PCR热循环参数为 :94℃预变性 5min ;94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min ,循环 4 0次 ;最后在 72℃延伸 6min。

关键词: 猕猴桃, RAPD-PCR, DNA提取