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马槟榔甜蛋白基因(MBLⅡ)的拼接与表达载体的构建

宋宗应;刘四新;胡新文;郭建春;   

  1. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,中国热带农业科学院热带生物技术研究所,中国热带农业科学院热带生物技术研究所,中国热带农业科学院热带生物技术研究所 海口571101,海口571101,海口571101,海口571101
  • 出版日期:2006-12-30 发布日期:2006-12-30
  • 基金资助:
    资助项目:教育部重点项目(204158)

  • Published:2006-12-30 Online:2006-12-30

摘要: 从云南植物Capparismasaikai中提取总DNA,设计引物克隆马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ,序列测定后经同源性分析表明与GeneBank中登陆的马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ(cDNA)序列一致,表明MBLⅡ不存在内含子序列。利用重叠区扩增基因拼接法(genesplicingbyoverlapextension,geneSOEing)进行体外基因剪接,剪接片段与植物表达载体pVKH相连,构建pVKH-35S-MBLⅡ-Pa、pVKH-35S-S-A+B-pA、pVKH-35S-A+B-pA、pVKH-35S-S-A-pA、pVKH-35S-S-B-pA,为寻找mabinlin的活性表达形式和翻译后剪接机制打下基础。

关键词: 甜蛋白, MBLⅡ基因, 重叠区扩增基因拼接, pVKH植物表达载体