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口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及检测应用

李任峰;何启盖;刘正飞;钱平;阮力;   

  1. 华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室,农业微生物学国家重点实验室,河南科技学院动物科学学院 武汉430070,新乡453003
  • 出版日期:2006-12-30 发布日期:2006-12-30
  • 基金资助:
    国家“十五”重大科技专项资金(2002BA514A-18)

  • Published:2006-12-30 Online:2006-12-30

摘要: 用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养上清液的效价是1:256,腹水效价是1:1280;以自行制备的兔抗FMDV高免血清IgG为捕获抗体包被酶联免疫吸附试验微量反应板,以单抗2G12为第二抗体,建立了快速检测FMDV抗原的双抗体夹心ELISA,该方法能检出90ng病毒,而且只与FMDV发生特异性反应,与猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和乙脑病毒(JEV)均不发生反应。本研究为检测口蹄疫病毒抗原提供了灵敏和特异的方法。

关键词: 口蹄疫病毒, 单克隆抗体, 双抗体夹心ELLSA, 抗原检测