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细菌人工染色体基因组文库构建关键技术研究

刘长青;吴宏梅;包阿东;陆涛峰;刘帅;张洪海;唐学玺;关伟军;马月辉;   

  1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;曲阜师范大学研究生处;
  • 出版日期:2008-08-26 发布日期:2008-08-26
  • 基金资助:
    国家“863”计划项目资助(2006AA10Z198)(2007AA10Z170)

  • Published:2008-08-26 Online:2008-08-26

摘要: 基因组文库是进行分子克隆和基因结构与功能研究的基础,完整覆盖的基因组文库的构建,使基因组任何DNA片段的筛选和获得成为可能。细菌人工染色体(Bacterial Artificial Chromosome,BAC)与其它载体系统相比具有转化效率高、嵌合体少、插入片段易回收,高覆盖率、稳定性强,并且具有易分离和操作等特性等优点而被广泛应用。作为物种保护策略的重要部分,构建我国濒危动植物品种基因组BAC文库,对于其遗传资源的保护和研究具有非常重要的作用。在查阅大量国内外相关资料的基础上,就BAC基因组文库构建过程中载体的制备、高分子量DNA的制备、大片段DNA的回收、连接与电击转化、基因组BAC文库质量鉴定等几个重点、难点问题进行了详细的论述和分析,对于构建高分子量插入片段、高覆盖率和稳定性的基因组文库提供理论基础与技术支撑。

关键词: 细菌人工染色体, 基因组文库构建, 质粒纯化, 高分子量DNA