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可可粉中几种外源植物源性成分的PCR检测

金永生;朱卫娟;廖祥儒;   

  1. 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;无锡出入境检验检疫局;
  • 出版日期:2008-10-26 发布日期:2008-10-26
  • 基金资助:
    国家质检总局科研项目(2006IK142)

  • Published:2008-10-26 Online:2008-10-26

摘要: 大豆粕、芝麻粕、花生壳和板栗壳是常见的几种可可粉外源掺假成分,根据它们所特有的基因片段设计引物,以高等植物18SrDNA基因为内参照基因,应用改良CTAB法抽提材料DNA,对分离的DNA进行PCR扩增并分析,建立了可可粉中这几种外源植物成分的快速检测方法。用建立的PCR方法对可可基因组进行扩增,均无特异条带;扩增出的PCR产物测序结果表明与目标片段一致;将各材料DNA倍比稀释,分别对各个稀释度的DNA进行PCR扩增。结果表明,该方法对大豆粕、芝麻粕、花生壳和板栗壳DNA检测的敏感度分别可达82.5pg/μl、32.5pg/μl、124pg/μl和157pg/μl。模拟样品试验发现,该方法的最低检测限(w/w)分别达0.5%、0.5%、5%和5%,可作为可可粉及其制品中这几种外源成分鉴别检测的有效方法。

关键词: 可可粉, 植物源性成分, PCR检测