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高亲和力克伦特罗单克隆抗体的研制及免疫试纸检测方法的建立

张海棠;王自良;刘玺;钟华;范国英;   

  1. 河南科技学院动物科学学院;河南科技学院食品学院;
  • 出版日期:2008-10-26 发布日期:2008-10-26
  • 基金资助:
    “十一五”国家科技支撑计划重大项目“农药、兽药抗体库建立”资助(2006BAK02A21/1)

  • Published:2008-10-26 Online:2008-10-26

摘要: 重氮化法将克伦特罗(CL)偶联于BSA合成免疫抗原BSA-CL,戊二醛法(GA)合成包被抗原OVA-CL,用BSA-CL免疫Balb/C小鼠。细胞融合技术建立高亲和力CL单克隆抗体(CLmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备CLmAb,并测定其亲和性。依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,应用CLmAb研制CL残留快速检测免疫试纸(CL-Strip),并测定其性能。结果表明,筛选出16株杂交瘤细胞,其中亲和力最高的为3C12-6H6,亲和常数(Ka)为1.76×1010L/mol。CL-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒和GC/MS相当,符合率为100%。CL-Strip具有具有敏感、特异、快速、简便的特点,可推广应用于CL残留的快速检测。

关键词: 克伦特罗, 细胞融合, 单克隆抗体, 胶体金免疫层析试验, 快速检测试纸