外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响

外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响

蔡振荣;易小萍;张元兴;

华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室;

出版日期:2009-01-26 发布日期:2009-01-26
基金资助:
国家“863”计划(30271372)

Published:2009-01-26 Online:2009-01-26

摘要/Abstract

摘要： 在前期的研究工作中发现,当培养基中添加1.5%DMSO(二甲基亚砜)会使CHO细胞的HBsAg(乙肝表面抗原)产量提高80%以上。与此同时,DMSO引起了HBsAg在细胞胞内的大量积累,其含量提高了8倍。同时,DMSO引起了CHO细胞中PDI(二硫键异构酶)含量降低。由此怀疑是由于PDI不足造成了HBsAg的胞内积累。根据NCBI上查阅到的中华仓鼠小肠中PDI基因序列,通过RT-PCR的方法,从CHO细胞中获得了PDI序列,并构建重组质粒pGFP-PDI。通过阳离子脂质体转染技术,导入外源PDI,使各单克隆CHO细胞的PDI酶活提高30%～90%。但分析这些克隆在1.5%DMSO下HBsAg的胞内积累情况,发现没有改善,从而排除了PDI不足而引起外源蛋白积累的可能。

关键词: 细胞培养, CHO细胞, HBsAg, PDI, DMSO

蔡振荣;易小萍;张元兴;. 外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响[J]. .

[1]	陈欣宁, 赵亮, 范里, 刘旭平, 谭文松. 氨浓度升高对CHO细胞维持期抗体融合蛋白的表达及N-糖基化的影响[J]. 生物技术通报, 2019, 35(3): 93-102.
[2]	张伊丽, 刘照平, 陆敏依, 蔡明勇, 吴根鹏. CO₂分压对贴壁细胞MRC-5连续传代培养的影响[J]. 生物技术通报, 2019, 35(10): 169-173.
[3]	王晨, 汪嘉琪, 赵亮, 范里, 刘旭平, 陈敏, 张理想, 谭文松. 二氧化碳分压和渗透压升高对CHO细胞维持期生长、代谢和产物表达的影响[J]. 生物技术通报, 2018, 34(3): 217-224.
[4]	胡冬冬, 赵亮, 范里, 刘旭平, 邓献存, 缪仕伟, 谭文松. 酵母抽提物对CHO细胞生长及抗体表达的影响[J]. 生物技术通报, 2017, 33(6): 162-169.
[5]	张鑫涛,唐红萍,赵亮,范里,刘旭平,缪仕伟,谭文松. 金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响[J]. 生物技术通报, 2016, 32(8): 233-241.
[6]	吴晨曦, 谢益民, 叶哲孜, 王鹏, 乐喜. DHP-半乳糖复合体制备多孔生物载体及其在人体肝细胞培养中的应用[J]. 生物技术通报, 2016, 32(6): 250-257.
[7]	王海涛, 金波, 李树伟. 新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达[J]. 生物技术通报, 2016, 32(5): 82-90.
[8]	肖尚,邓崇飞,柯军,鄢成伟,孙文正,杨彬. pH对重组CHO细胞生长、单抗表达及质量的影响[J]. 生物技术通报, 2015, 31(12): 256-261.
[9]	刘金涛,王星懿,范里,邓献存,刘旭平,谭文松. 大型反应器内pH不均一性对CHO细胞流加培养过程的影响[J]. 生物技术通报, 2015, 31(10): 236-241.
[10]	乌吉斯古冷;汤睿智;邢万金;. Wistar大鼠Pdia3 cDNA的克隆及原核表达[J]. , 2011, 0(09): 102-107.
[11]	吕利霞;汤睿智;邢万金;. PDIA3的结构与功能及其在精卵融合过程中的作用[J]. , 2010, 0(03): 31-34.
[12]	邵强;冯真真;张勇朝;潘若文;徐玉国;. 荧光定量PCR法检测重组汉逊酵母中HBsAg基因的拷贝数[J]. , 2009, 0(10): 178-180.
[13]	张秋婷;苗向阳;安铁洙;. 饲养层及细胞因子对鸡PGCs体外培养的影响[J]. , 2009, 0(06): 55-58.
[14]	杨帆;韩烈保;. 高羊茅胚性悬浮细胞系的快速建立及其单细胞培养[J]. , 2009, 0(04): 71-76.
[15]	梅翀;黄岂平;夏俊培;徐东;陈效;. 细胞培养基底单轴拉伸装置的研制[J]. , 2008, 0(02): 77-79.

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