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染色体步移技术研究进展

梁成真;张锐;郭三堆;   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程;
  • 出版日期:2009-10-26 发布日期:2009-10-26
  • 基金资助:
    农业部国家转基因重大专项“转基因抗旱耐盐碱棉花新品种培育”(2008ZX005-004)

  • Published:2009-10-26 Online:2009-10-26

摘要: 染色体步移技术是一种常用的克隆已知片段旁侧序列的技术。综述了近年来染色体步移技术的发展情况,介绍了结合基因组文库的染色体步移技术和基于PCR的染色体步移技术。同时总结了物理剪切法和限制性内切酶法构建亚克隆文库的优化步骤,以及连接成环PCR法、外源接头介导PCR法和半随机引物PCR法的原理,并且比较分析了他们之间的优缺点,以期对实际操作起到借鉴作用。

关键词: 染色体步移, 侧翼序列, BAC克隆, 反向PCR, 外源接头介导PCR, 半随机引物PCR