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弓形虫上海株的棒状体蛋白ROP2的克隆表达及纯化

蒋蔚;王权;陈永军;聂福旭;   

  1. 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室;
  • 出版日期:2010-01-26 发布日期:2010-01-26
  • 基金资助:
    农业公益性行业科研专项经费项目(200803017);; 上海市科技兴农重点攻关项目沪农科攻字[(2006)第5-4号]

  • Published:2010-01-26 Online:2010-01-26

摘要: 根据已发表基因序列(GenBank登录号为Z36906)设计引物,以弓形虫(Toxoplasma gondii)上海本地株的基因组DNA为模板,扩增编码ROP2(rhpotry protein2)蛋白的基因片段,定向克隆至表达质粒pET32a(+),重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为1044bp,与GenBank上登录的序列相比,同源性为96%-100%,其中与弓形虫RH株的rop2基因同源性为100%。重组原核表达质粒pET32a-rop2转化至大肠杆菌BL21(DE3),经诱导可表达分子量约60.9kD的融合蛋白,能被感染弓形虫RH株的绵羊阳性血清识别。

关键词: 弓形虫本地株, ROP2蛋白, 克隆表达