枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达

枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达

李海军;王林刚;王治泽;陈芳;高剑峰;

石河子大学生命科学学院;

出版日期:2010-03-26 发布日期:2010-03-26
基金资助:
2008年度教育部促进与美大(美洲与大洋洲)地区科研合作与高层次人才培养项目

Published:2010-03-26 Online:2010-03-26

摘要/Abstract

摘要： 借助生物信息学对已克隆的枯草杆菌脂肪酶LipB2全长基因序列进行比对分析。结果显示该脂肪酶基因全长635bp,编码包括31个氨基酸分泌型信号肽在内的211个氨基酸,与NCBIGenBank中已报道的枯草杆菌属脂肪酶核苷酸序列有94.0%的一致性。将该基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用枯草杆菌脂肪酶的信号肽序列进行了分泌表达。SDS-PAGE电泳显示分泌表达的脂肪酶分子质量约为21kD。对表达条件优化后,在30℃、大肠杆菌菌液OD600值为1.8、乳糖诱导浓度为1.5mM、摇瓶发酵10h后大肠杆菌分泌表达26.0U/mL重组脂肪酶,相比较IPTG的诱导,既实现了脂肪酶的高效表达,又节省了成本。

关键词: 乳糖诱导, IPTG诱导, 枯草杆菌, 脂肪酶基因, 分泌表达

李海军;王林刚;王治泽;陈芳;高剑峰;. 枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达[J]. .

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