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短蛸AFLP分子标记分析体系的优化与建立

张龙岗;杨建敏;刘相全;   

  1. 山东省海洋水产研究所;山东省淡水水产研究所;
  • 出版日期:2010-05-26 发布日期:2010-05-26
  • 基金资助:
    山东省优秀中青年科学家奖励基金项目(2006BS06010);; 山东省科技攻关项目(2006GG2205028);; 国家“863”计划项目(2007AA09Z433)

  • Published:2010-05-26 Online:2010-05-26

摘要: 本研究构建了短蛸扩增片段长度多态性(AFLP)分析体系,对DNA提取、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应和银染等步骤进行了分析。得到了一种适于短蛸AFLP技术分析的优化体系,该体系中各优化因素为:模板DNA浓度为200 ng/μL;酶切体系中,MseI和EcoR I各加入5 units,缓冲液使用MseI buffer Tango,反应时间为3-4 h;连接最适反应时间为12 h;预扩增产物最适稀释倍数为20倍。该体系的构建为AFLP技术在短蛸分子遗传多样性研究中的应用奠定了基础。

关键词: AFLP, 短蛸, 反应体系优化