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麦冬基因组DNA提取方法研究

王冠明;韩烈保;马秀杰;程晓霞;   

  1. 北京林业大学草坪研究所暨森林培育与保护省部共建实验室;长江大学园艺园林学院;
  • 出版日期:2010-06-26 发布日期:2010-06-26
  • 基金资助:
    国家“863”计划(2006AA10Z132);; “十一五”国家科技支撑项目(2006BAD01A19-4,2006BAC18B04-1);; 北京市教育委员会——北京市重点学科建设项目;; 北京市教育委员会学科建设与研究生培养项目资助——产学研联合培养研究生基地——北京城市生态环境建设

  • Published:2010-06-26 Online:2010-06-26

摘要: 为了从富含多糖、多酚的顽拗植物麦冬中分离出高质量基因组DNA,分别建立了改良CTAB法和改良SDS法。通过使用核分离液和CTAB/NaCl溶液、提取液中加入0.35倍体积无水乙醇等最大限度地除去杂质。将两种方法提取的8种麦冬DNA与两种离心柱式试剂盒提取的DNA在纯度、产率等方面进行对比,并进行双酶切和SRAP分析。麦冬类植物SRAP反应体系的建立尚属首次。结果表明,改良CTAB法和改良SDS法均能从8种麦冬叶片中提取到高质量的基因组DNA,改良CTAB法提取纯度更高,提取幼叶DNA纯度可以与离心柱式试剂盒媲美,能够满足多种分子生物学试验要求。在后续试验中,用改良CTAB法从20多种沿阶草族植物中提取到了高纯度DNA。该方法通用性好,提取的DNA纯度高,对其他顽拗类植物基因组DNA的提取具有借鉴意义。

关键词: 麦冬, CTAB, SDS, DNA提取, 高质量DNA