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PCR构建融合基因方法的建立

陈国梁;白兴俊;赵蓉;雷鸿亮;陈宗礼;   

  1. 延安大学生命科学学院陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心;
  • 出版日期:2010-08-26 发布日期:2010-08-26
  • 基金资助:
    延安大学专项科研基金项目(YDK2008-17);; 延安大学大学生科技创新训练项目(YD2009-208)

  • Published:2010-08-26 Online:2010-08-26

摘要: 以聚合酶链式反应为基础的片段拼接技术——融合PCR技术是一种新的基因片段融合技术。以含有马铃薯块茎两种淀粉合成关键酶ssⅡ和ssⅢ基因为模板,利用融合PCR对其进行融合拼接,初步建立以PCR产物(不回收)及一步PCR法融合基因的构建方法,并对融合基因构建时PCR产物(不回收)的使用量及一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度等条件进行优化。结果表明,以不回收的PCR产物为模板构建融合基因时PCR产物(不回收)的使用量在10-20 ng范围内为佳;一步PCR法构建融合基因的中间引物浓度在25-1 000 nmol/L为宜。

关键词: 融合基因, 一步PCR法, 模板浓度, 引物浓度