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MAR介导的逆转录病毒包装细胞系的建立

张靖;王天云;张俊河;杨保胜;张继红;   

  1. 新乡医学院三全学院生命科学技术系;新乡医学院生物化学与分子生物学教研室;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    河南省科技厅科技攻关项目(0624410041)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 根据GenBank登录的序列号,使用primer5.0进行引物设计,提取人的外周血基因组DNA为模板,PCR方法扩增出人β-珠蛋白MAR序列,将MAR序列插入到逆转录病毒表达载体pLXSN,构建MAR序列介导的逆转录病毒载体。酶切和测序鉴定后,阳离子聚合物转染PA317细胞,G418筛选出阳性细胞克隆,提取病毒液上清,测定逆转录病毒颗粒滴度,逆转录病毒颗粒的最高滴度为1.6×106CFU/mL,成功建立了MAR介导的逆转录病毒包装细胞系。

关键词: 核基质结合区, 逆转录病毒载体, 包装细胞系