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双标准曲线相对定量PCR试验原理与方法

徐丽华;刘春雷;常玉梅;梁利群;刘金亮;高国强;韩启霞;   

  1. 中国水产科学院黑龙江水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院;
  • 出版日期:2011-01-26 发布日期:2011-01-26
  • 基金资助:
    国家重点基础研究发展计划“973”项目(2010CB126305);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2009HSYZX-SJ-05)

  • Published:2011-01-26 Online:2011-01-26

摘要: 实时荧光定量PCR(FQ-PCR)是一种准确有效的核酸定量分析技术,具有易操作、高通量、高敏感性、高特异性、高度自动化和低污染等优点,并随新定量PCR仪及新操作方法的发展而得到广泛应用,但是,定量PCR的高敏感性特点使得实验操作严格而繁琐。阐述了一种改进的相对定量方法——双标准曲线法的试验原理和特点,描述了定量PCR体系的优化方式,探讨了试验误差分析方法及试验操作技巧,并就试验数据的处理方法进行讨论。试验证明,双标准曲线法是一种经济、简单而准确的定量方法。

关键词: 双标准曲线法, 相对定量PCR, 荧光扩增曲线, 试验误差分析, 归一化值