薰衣草高质量DNA提取及ISSR-PCR多重化体系的建立

薰衣草高质量DNA提取及ISSR-PCR多重化体系的建立

权俊萍;贾晓鹰;戴丽娜;肖俊辉;田琴;牛攀新;吕国华;

石河子大学农学院;石河子大学设施生物种苗研发中心;

出版日期:2012-05-26 发布日期:2012-05-26
基金资助:
石河子大学动植物育种专项(gxjs2009-yz03);石河子大学高层次人才引进项目(RCZX200819)

Published:2012-05-26 Online:2012-05-26

摘要/Abstract

摘要： 以伊犁薰衣草‘701’新鲜叶片为材料,对4种基因组DNA提取方法进行比较,并通过单因子梯度比较试验结合L9(34)正交优化设计,对ISSR-PCR扩增体系中退火温度、DNA、Mg2+、dNTP和引物浓度进行最佳条件及配比筛选。结果表明,改良3×CTAB法是薰衣草高质量DNA少量提取的最佳方法 ;建立薰衣草ISSR-PCR扩增优化体系为,20μL反应体系中包括模板DNA 50 ng,Mg2+3 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.3 mmol/L,Taq酶1 U;扩增程序退火温度为56℃。运用本试验建立的ISSR-PCR优化体系,对5份薰衣草种质进行了初步验证,获得了良好的多样性扩增条带。

关键词: 薰衣草, DNA提取, ISSR-PCR, 正交设计, 体系优化

权俊萍;贾晓鹰;戴丽娜;肖俊辉;田琴;牛攀新;吕国华;. 薰衣草高质量DNA提取及ISSR-PCR多重化体系的建立[J]. .

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