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稳定表达重组小鼠FAPα蛋白细胞株的构建

张欢;方瑞;黄思超;杨倩之;杜军;蔡绍晖;   

  1. 暨南大学药学院;中山大学药学院;珠海市人民医院药剂科;
  • 出版日期:2012-05-26 发布日期:2012-05-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(30973565)

  • Published:2012-05-26 Online:2012-05-26

摘要: 采用RT-PCR方法从BALB/c胚鼠成纤维细胞克隆FAPα基因,将其连接至表达载体pTd-FL-N,转化Stbl3感受态。筛选重组质粒,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确。将表达载体转染HEK293细胞,经G418筛选单克隆阳性细胞,采用Western blot技术证实稳定表达FAPα细胞株构建成功。通过流式细胞术确定FAPα蛋白可定位表达于细胞膜上。

关键词: FAPα, pTd-FL-N表达载体, G418筛选, 稳定细胞株