]*>","")" /> 稳定转染结合流式分选技术筛选猪GBP1,GBP2基因高表达PK-15细胞

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稳定转染结合流式分选技术筛选猪GBP1,GBP2基因高表达PK-15细胞

马国剑;黄菁;贾浩;李奎;赵书红;   

  1. 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;
  • 出版日期:2012-07-26 发布日期:2012-07-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金青年基金项目(31000541),国家自然科学基金广东联合基金重点项目(U0631005);;

  • Published:2012-07-26 Online:2012-07-26

摘要: 猪的GBP1,GBP2基因是重要的抗病候选基因,建立其高表达细胞模型可为深入研究基因的抗病能力及机理提供良好的素材。利用pEGFP载体上的Neor抗性筛选标记,采用G418药物筛选方法,结合利用GFP荧光标记,采用流式细胞分选技术,获得了超表达猪GBP1和GBP2基因的PK-15细胞,并通过定量PCR方法对筛选后细胞的超表达效果进行验证。结果显示猪GBP1和GBP2基因在转录水平的表达量相对于正常的PK-15细胞分别升高了近40倍和60倍,表明药物筛选结合流式分选是获得目的基因稳定高表达细胞株的快速便捷的方法。

关键词: 猪GBP1, GBP2 PK-15细胞, 稳定转染, 流式分选