农杆菌介导大豆子叶节影响因素的研究

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.013

生物技术通报 ›› 2015, Vol. 31 ›› Issue (12): 91-96.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.12.013

农杆菌介导大豆子叶节影响因素的研究

杨晓倩,李桂兰,刘晨光,董秋平,张锴,乔亚科

河北科技师范学院生命科技学院，昌黎 066600

收稿日期:2015-03-28 出版日期:2015-12-19 发布日期:2015-12-19
作者简介:杨晓倩，女，硕士研究生，研究方向:作物遗传育种；E-mail:18330381190@163.com
基金资助:
转基因重大专项(2014ZX0800404B)

The Factors Affecting Genetic Transformation of Soybean Cotyledon Node Mediated by Agrobacterium tumefacions

Yang Xiaoqian, Li Guilan, Liu Chenguang, Dong Qiuping, Zhang Kai, Qiao Yake

Life Science and Technology Institute，Hebei Normal University of Technology，Changli 066600

Received:2015-03-28 Published:2015-12-19 Online:2015-12-19

摘要/Abstract

摘要： 为提高大豆遗传转化效率, 采用农杆菌介导遗传转化的方法，以大豆子叶节为外植体，研究共培养阶段浸染液浓度及外界培养条件(共培养温度和天数)和培养基添加物对转化效率和芽诱导率的影响。结果显示，浸染液OD₆₀₀=0.5的诱导率最高，共培养温度为24℃，共培养天数为10 d具有较高转化效率，共培养基中加入一定浓度的单壁碳纳米管(Single-wall carbon nanotube，NM)对诱导卡那霉素抗性不定芽有促进作用。PCR检测表明PHR1基因已整合到T1代大豆基因组中，初步证明可在大豆基因组中稳定遗传。

关键词: 农杆菌介导, 大豆子叶节, 共培养, 单壁碳纳米管

Abstract: It was to improve the efficiency of soybean genetic transformation, we used the soybean cotyledon node as explants via Agrobactium-mediated transformation method, and investigated the effect of bacterial concentration, co-culture temperature and time on the transformation efficiency and the rate of bud induction. The results showed that under the OD₆₀₀= 0.5 of infection solution concentration, and induction rate was the highest. The conversion efficiency was higher under the environment of co-culture temperature being 24℃ for 10 days. The single-wall carbon nanotubes added to culture medium improved the induction of the adventitious bud with kanamycin-resistance. Moreover, the PCR results indicated that PHR1 gene was integrated into T1 genome generation, preliminarily proving that the heredity of gene in the soybean genome was stable.

Key words: Agrobactium-mediated, soybean cotyledon node, co-culture, single-wall carbon nanotube

杨晓倩,李桂兰,刘晨光,董秋平,张锴,乔亚科. 农杆菌介导大豆子叶节影响因素的研究[J]. 生物技术通报, 2015, 31(12): 91-96.

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