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巨型艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建

张建哲;韩红玉;姜连连;董辉;赵其平;卞庆松;闫晓菲;黄兵;   

  1. 上海师范大学生命与环境科学学院,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室,中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室 上海200234,中国农业科学院上海兽医研
  • 出版日期:2008-04-26 发布日期:2008-04-26
  • 基金资助:
    国家科技基础条件平台建设项目(2005DKA21205-4)

  • Published:2008-04-26 Online:2008-04-26

摘要: 为构建巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)孢子化卵囊cDNA表达文库,从E.maxima孢子化卵囊中提取总RNA,以总RNA为模板、λTriplex2TM为载体,利用SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建全长cDNA表达文库。经测定构建的E.maxima cDNA表达文库的原始文库容量为1×106 pfu/ml,扩增后的文库滴度为5×1010 pfu/ml,重组率为95%,插入片断主要集中在0.5~1kb之间。根据已知序列设计引物,能从文库中扩增出编码E.maxima免疫球蛋白重链结合蛋白的基因序列片段。结果表明所构建的E.maxima cDNA表达文库质量良好,为克隆、筛选E.maxima的功能性基因奠定了基础。

关键词: 球虫, 巨型艾美耳球虫, cDNA文库, SMART技术