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clGH与EGFP基因融合表达载体的构建及其在斑马鱼胚胎发育阶段的表达

杨学明;郑凯迪;陈桂来;蒋和生;李云;   

  1. 广西水产研究所;广西大学动物科技学院;西南大学动物科技学院;
  • 出版日期:2010-06-26 发布日期:2010-06-26
  • 基金资助:
    广西科学基金项目(0832213)

  • Published:2010-06-26 Online:2010-06-26

摘要: 以模式动物斑马鱼(Danio rerio)为材料,研究了革胡子鲶生长激素(growth hormone of clarias lazera,clGH)基因的表达。以clGH基因为外源基因,以增强型荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因为报告基因,通过体外酶切和连接,构建了含有这两个基因的融合表达载体pCEGFP-clGH。通过显微注射方法,将pCEGFP-clGH转入斑马鱼受精卵进行表达。结果显示,成功得到了携带外源clGH基因的转基因斑马鱼,并可在胚胎发育的不同阶段(0-72h)观察到绿色荧光,荧光表达率分别为7.2%,45.7%,71.7%和8.5%;外源基因的表达特点为嵌合型、瞬时表达;外源基因最早在斑马鱼胚胎发育的囊胚期(3h)开始表达,在注射后24h达到最强,在仔鱼孵出前后(72h)表达水平降至最低。本试验构建的融合表达载体正确,为今后进一步研究clGH基因的功能及利用clGH基因进行快速生长转基因鱼的培育提供参考。

关键词: 革胡子鲶, GH基因, 显微注射, 斑马鱼