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基于DIG-化学发光法的Southern blot方法优化

张晓;张锐;于源华;史计;孟志刚;孙国清;周焘;郭三堆;   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所国家农作物基因资源与遗传改良重大科学工程;长春理工大学生命科学技术学院;
  • 出版日期:2011-09-26 发布日期:2011-09-26
  • 基金资助:
    国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2008ZX08005-004)

  • Published:2011-09-26 Online:2011-09-26

摘要: 目前,基于DIG-化学发光法的Southern blot技术已在生物实验室广泛应用,但在试验过程中经常会遇到背景黑、目的信号弱等问题,以致不能获得理想结果。在棉花线粒体基因组RFLP分析过程中结合前人经验对基于DIG-化学发光法的Southern blot技术在探针标记、探针浓度、探针剥离等方面进行了优化。优化后的方法重复性好,一张转好的尼龙膜最多可以反复使用11次;一份杂交液在两年内至少可以反复使用5次且不会明显降低杂交效果。

关键词: Southern blot, DIG标记, 化学发光法, 尼龙膜, 探针