链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA

链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA

王继华;信爱国;朱明旺;苗海生;胡骑;廖德芳;李乐;李华春;

云南省保山疫苗厂;云南省畜牧兽医科学院农业部热带亚热带动物病毒学重点开放实验室云南省热带亚热带动物病毒重点实验室;

出版日期:2012-01-26 发布日期:2012-01-26
基金资助:
云南省农业科技创新工程项目(2008LA019);;

Published:2012-01-26 Online:2012-01-26

摘要/Abstract

摘要： 旨在建立一种快速、灵敏、特异的检测口蹄疫病毒在复制过程中产生的负链RNA的方法。根据口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)病毒5'-非编码区(5'-UTR)基因序列,设计了5条引物链特异性RT-PCR引物,建立检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法。提取FMD病毒RNA,应用设计的正向引物T1-H1做反转录引物,经反转录和RNA酶A消化后,再经两轮链特异性PCR扩增,可特异性地检测FMDV在复制过程中产生的负链RNA。所建立的检测口蹄疫病毒负链RNA的链特异性RT-PCR方法是一种可靠的方法,在确定细胞培养物和动物感染FMDV的病毒复制和了解病毒的致病性研究中具有应用前景。

关键词: 口蹄疫病毒, 链特异性RT-PCR, 复制中间体, 负链RNA, 感染

王继华;信爱国;朱明旺;苗海生;胡骑;廖德芳;李乐;李华春;. 链特异性RT-PCR方法检测口蹄疫病毒负链RNA[J]. .

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