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影响牛胚胎干细胞分离克隆因素的研究

李松;窦忠英;华进联;李相运;宋文刚;曲迅   

  1. 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室,西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室,西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室,西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室,泰山医学院?
  • 出版日期:2002-06-26 发布日期:2002-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目 (C0 10 90 2 );; 国家“九五”重点攻关课题

  • Published:2002-06-26 Online:2002-06-26

摘要: 采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养及传统饲养层培养方式 ,以高糖DMEM ,添加 0 .1mM2 -巯基乙醇、犊牛血清、细胞因子为培养基 ,以 4~ 13周龄屠宰牛胎儿为实验材料 ,探讨影响牛原始生殖细胞分离克隆胚胎干细胞的相关因素。结果发现 :当犊牛血清为 15 %时效果最好 ;细胞因子添加与否对胚胎干细胞的分离及同源牛胎儿成纤维细胞的贴壁与生长影响并不显着 ,而在传代过程中有一定影响 ;以 0 .2 %胰酶 +0 .0 4 %EDTA为细胞消化液效果最佳 ;以同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆牛胚胎干细胞 ,本研究观察到效果最好

关键词: 牛, 原始生殖细胞, 胚胎干细胞, 分离克隆