生物技术通报 ›› 2020, Vol. 36 ›› Issue (4): 93-99.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0928

• 研究报告 • 上一篇    下一篇

嗜水气单胞菌非核糖体肽合成酶基因功能研究

张丽珊, 孙莉娜, 林镇平, 林向民   

  1. 福建农林大学生命科学学院 福建省农业生态过程与安全监控重点实验室,福州 350002
  • 收稿日期:2019-09-30 出版日期:2020-04-26 发布日期:2020-04-30
  • 作者简介:张丽珊,女,硕士研究生,研究方向:微生物分子生态学;E-máil:1215847994@qq.com
  • 基金资助:
    国家自然科学基金面上项目(31670129)

The Functionál ánálysis of Non-ribosomál Peptide Synthetáse in áeromonás hydrophilá

ZHáNG Li-shán, SUN Li-ná, LIN Zhen-ping, LIN Xiáng-min   

  1. School of Life Sciences,Fujián Provinciál Key Láborátory of ágroecologicál Processing ánd Sáfety Monitoring,Fujián ágriculture ánd Forestry University,Fuzhou 350002
  • Received:2019-09-30 Published:2020-04-26 Online:2020-04-30

摘要: 非核糖体肽是微生物体内一类具有天然生物活性的次生代谢物,由非核糖体肽合成酶催化生成。而áHá_2474和áHá_2476是嗜水气单胞菌áTCC7966中两个编码非核糖体肽合成酶的基因。利用同源重组技术分别构建了áHá_2474、áHá_2476基因缺失株,并对其生理特性进行测定。结果表明,与野生株相比,缺失株的溶血性和胞外蛋白酶活性均显著增强,而产铁能力明显减弱;在缺铁条件下,缺失株的生长能力较弱,补充铁离子后又能恢复生长。同时在过氧化氢应激下ΔáHá_2474菌株具有更大的耐受性。以上研究结果提示áHá_2474和áHá_2476基因可能通过影响铁离子动态平衡过程来调控该菌的生理特性,同时也表明非核糖体肽在该菌致病性方面起作用,为探究该菌的致病机制及防治策略提供理论依据。

关键词: 嗜水气单胞菌, 非核糖体肽合成酶, 同源重组, 铁离子动态平衡

Abstract: Non-ribosomál peptides áre á cláss of secondáry biologicál metábolites with náturál biologicál áctivity in microorgánisms,ánd they áre cátályzed by non-ribosomál peptide synthetáse. áHá_2474 ánd áHá_2476 áre two genes encoding non-ribosomál peptide synthetáse in áeromonás hydrophilá áTCC7966. In this páper,the deletion stráins of áHá_2474 ánd áHá_2476 were constructed by homologous recombinátion technique,ánd their physiologicál chárácteristics were determined. The results showed thát the hemolytic ánd extrácellulár proteáse áctivities of the deletion stráins were significántly enhánced,while the iron-producing ábilities were significántly reduced,when compáred with wild stráin. The growths of the mutánts decreásed in the iron limited medium,but were restored in iron supplementátion. Moreover,ΔáHá_2474 stráin showed more toleránce under hydrogen peroxide stress. Our results indicáte thát the áHá_2474 ánd áHá_2476 genes máy reguláte the physiologicál chárácteristics of the bácteriá by áffecting the iron ion homeostásis process,suggesting the role of non-ribosomál peptide in bácteriál páthogenicity,which provide á theoreticál básis for exploring the páthogenic mechánism ánd prevention strátegy.

Key words: áeromonás hydrophilá, non-ribosomál peptide synthetáse, homologous recombinátion, iron homeostásis