目的基因全长cDNA合成及克隆技术进展

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目的基因全长cDNA合成及克隆技术进展

张光祥;马正强

南京农业大学作物遗传与种质创新国家级重点实验室,南京农业大学作物遗传与种质创新国家级重点实验室南京210095

出版日期:2003-10-26 发布日期:2003-10-26
基金资助:
“973”前期专项 ( 2 0 0 2CCA0 13 0 0 )资助

Published:2003-10-26 Online:2003-10-26

摘要/Abstract

摘要： 在基因克隆、基因功能和表达调控研究中 ,获得目的基因尤其是表达丰度低的基因全长cDNA仍然是一个技术难题。本文对近年来有关反转录过程中影响全长cDNA合成的因素与对策的研究进行了总结 ,特别对消除mRNA二级结构阻碍的方法及其效果、较高反应温度和金属离子对模板mRNA完整性的影响、RNA分子伴侣在反应温度不变的情况下改善cDNA第一链质量的效果等作了较为详细的介绍。此外 ,还介绍了确保具有完整5′端的cDNA进入后续研究的几种新方法。

关键词: 全长cDNA, 反转录, RNA分子伴侣, 5′末端帽子结构, mRNA二级结构, 5′-RACE, cDNA文库

张光祥;马正强. 目的基因全长cDNA合成及克隆技术进展[J]. .

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