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番茄红素环化酶基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

李晔;赵杰;袁其朋;郑建全;   

  1. 北京化工大学生命科学与技术学院,军事医学科学院毒物药物研究所,北京化工大学生命科学与技术学院,军事医学科学院毒物药物研究所 北京100029,北京100850,北京100029,北京100850
  • 出版日期:2006-08-26 发布日期:2006-08-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(No.20376007)

  • Published:2006-08-26 Online:2006-08-26

摘要: 目的利用RNA干扰技术,构建靶向番茄红素环化酶基因(CarR)的干扰质粒,为选择性抑制番茄红素环化酶活性以提高番茄红素产量,奠定基础。方法用DNA重组技术将针对三孢布拉氏霉菌CarR的不同部位所设计的3对shRNA序列克隆到真核表达质粒mU6 pro中,构建CarR shRNA表达质粒重组体mU6 CarR shRNA1、2、3,转化DH5а菌株扩增。提取质粒行酶切鉴定后,进行测序分析。结果3个CarR shRNA表达载体mU6 CarR shRNA1、2、3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确。结论成功构建了CarR shRNA表达载体mU6 CarR shRNA,重组体的成功构建为研究CarR靶向RNA干扰番茄红素的环化打下基础。

关键词: 番茄红素, CarR, RNA干扰