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角鲨烯合成酶特异性mU6-siRNA真核表达载体的构建及鉴定

李文进;袁其朋;李晔;程冰;   

  1. 北京化工大学生命科学与技术学院,北京化工大学生命科学与技术学院,北京化工大学生命科学与技术学院,北京化工大学生命科学与技术学院 北京100029,北京100029,北京100029,北京100029
  • 出版日期:2007-06-26 发布日期:2007-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(No.20576010)

  • Published:2007-06-26 Online:2007-06-26

摘要: 利用RNA干扰技术靶向构建角鲨烯合成酶基因ERG9特异性真核表达载体。将针对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe Linder)ERG9不同部位所设计的3对siRNA序列通过重组技术克隆到质粒mU6 pro中构建真核表达重组体mU6 ERG9 siRNA1、2、3,转化DH5α菌株扩增,提取质粒通过限制性酶切和测序分析对重组表达载体进行鉴定,分析结果表明3个表达载体的设计基因插入正确,成功构建了ERG9特异性真核表达载体mU6 ERG9 siRNA,重组体的成功构建为在裂殖酵母细胞中靶向RNA干扰角鲨烯的合成从而提高辅酶Q10合成途径的代谢通量打下基础。

关键词: 角鲨烯合成酶, RNA干扰, ERG9, 辅酶Q_(10)