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家蝇幼虫抗菌肽的超声诱导及分离纯化和活性研究

陈曼;文阳安;周义文;涂植光;   

  1. 重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,深圳市孙逸仙心血管医院检验科,重庆医科大学医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室 重庆400016,重庆400016,深圳518020,重庆400016
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30472106)

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 目的:分离纯化家蝇(Musca domestica)幼虫免疫血淋巴中的抗菌肽,研究抗菌肽的性质和抑菌特性。为进一步研究家蝇幼虫抗菌肽的产生及应用提供实验基础。方法:通过超声处理诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,结合高速离心,两步CM-Sepharose离子交换层析,冷冻干燥浓缩等步骤,分离得到一种具抗菌活性的蛋白质。用Tricine-SDS-PAGE鉴定抗菌肽的纯度和性质,抑菌试验分析抗菌肽的抑菌特性。结果:300W,50Hz超声处理60s能够诱导家蝇幼虫产生抗菌肽,经分离纯化后Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示为一条带,相对分子量大约为5.8kD。纯化蛋白对阴沟肠杆菌,绿脓杆菌等G-杆菌的抑菌活性较强,而对金黄色葡萄球菌效果不显着。结论:诱导和纯化了一种家蝇幼虫抗菌肽,为此类活性物质的分离纯化提供了有效的方式。

关键词: 家蝇, 抗菌肽, 分离纯化, 超声诱导