]*>","")" /> 变性高效液相色谱检测沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌

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变性高效液相色谱检测沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌

徐君怡;曹际娟;郑秋月;刘淑艳;徐杨;   

  1. 辽宁出入境检验检疫局;
  • 出版日期:2009-03-26 发布日期:2009-03-26
  • 基金资助:
    国家“十一五”科技支撑计划课题(2006BAK02A13)

  • Published:2009-03-26 Online:2009-03-26

摘要: 应用多重PCR反应(multiplex PCR,mPCR)结合变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquidchromatography,DHPLC)技术建立食品中沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的快速检测方法。以编码沙门氏菌的fimY基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码肠出血性大肠杆菌O157:H7的rfbE基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了快速鉴别沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的多重PCR体系,扩增产物分别为284、159和499 bp,并验证了该多重PCR具有特异性。沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7标准菌株稀释成不同梯度,做灵敏度检测。试验结果表明该方法有很好的特异性,且灵敏度高,检测限可达到:沙门氏菌1.5 CFU/ml、空肠弯曲菌15 CFU/ml、肠出血性大肠杆菌O157:H7 15 CFU/ml。在随机采集的226份冷冻鸡肉类样品中,检出了7份样品为沙门氏菌阳性、10份为空肠弯曲菌阳性、1份为肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性。研究建立的多重PCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对沙门氏菌、空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌O157:H7的快速检测。

关键词: 沙门氏菌, 空肠弯曲菌, 肠出血性大肠杆菌O157:H7, 变性高效液相色谱