]*>","")" /> 嗜线虫致病杆菌Xna基因同源重组载体的构建及遗传转化体系的建立

• 论文 • 上一篇    下一篇

嗜线虫致病杆菌Xna基因同源重组载体的构建及遗传转化体系的建立

魏明敏;邱德文;曾洪梅;黄建新;杨秀芬;袁京京;   

  1. 西北大学生命科学学院;中国农业科学院植物保护研究所;
  • 出版日期:2009-04-26 发布日期:2009-04-26
  • 基金资助:
    中国农业科学院植保所基本科研业务费用专项资金资助项目

  • Published:2009-04-26 Online:2009-04-26

摘要: 构建嗜线虫致病杆菌Xna基因的同源重组载体和建立该细菌的遗传转化体系。扩增嗜线虫致病杆菌XNA基因的左右同源片段及质粒PEASY-T1上的卡那抗性基因Km;利用重叠延伸引物PCR法将这3个片段连接起来,然后将其克隆至自杀性载体PJQ200。采用电激法将同源重组载体DNA转化到供体细菌,再利用二亲本结合转移方法将供体细菌中的载体转化到受体细菌CB6菌株。结果成功地扩增了Xna基因的左右同源臂及卡那抗性基因的全长融合片段、构建了Xna基因的同源重组载体,并建立了嗜线虫致病杆菌北京变种的遗传转化体系。

关键词: 嗜线虫致病杆菌, 同源重组载体, 重叠延伸引物PCR法, 结合转移