地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆与毕赤酵母表达

地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆与毕赤酵母表达

李兴暖;韩雅莉;

九江学院基础医学院;汕头大学医学院;广东工业大学轻工化工学院;

出版日期:2009-11-26 发布日期:2009-11-26
基金资助:
国家自然科学基金(30772739);; 博士后科学基金(20080430850)

Published:2009-11-26 Online:2009-11-26

摘要/Abstract

摘要： 依据已报道的地鳖虫成熟肽cDNA序列设计引物,通过RT-PCR法从地鳖虫(Eupolyphage sinensis Walker)中克隆得到675bp地鳖虫纤溶活性蛋白(fibrinolytic protein,EFP)成熟肽编码序列。将此片段克隆到表达载体pPICZα-A中,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达得到重组表达蛋白,经SDS-PAGE电泳和活性鉴定,表明重组EFP在毕赤酵母中均获得表达,重组表达蛋白相对分子质量为28.2kD,表达产物分子质量与理论分子质量相符。重组蛋白在毕赤酵母中以分泌形式表达,具有纤溶活性。

关键词: 地鳖虫, 纤溶活性蛋白基因, cDNA克隆, 毕赤酵母表达

李兴暖;韩雅莉;. 地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆与毕赤酵母表达[J]. .

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