]*>","")" /> 含抑制素重组质粒的减毒猪霍乱沙门氏菌C500遗传稳定性研究

• 论文 • 上一篇    下一篇

含抑制素重组质粒的减毒猪霍乱沙门氏菌C500遗传稳定性研究

甄艳红;韩丽;梁爱心;王庆玲;杨利国;   

  1. 华中农业大学动物科技学院;
  • 出版日期:2009-06-26 发布日期:2009-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(30771549);; 教育部博士点基金(20070504019)

  • Published:2009-06-26 Online:2009-06-26

摘要: 为了分析研究含抑制素重组质粒pVAX-IS-asd(以下简写为pXAIS)的crp(cAMP受体蛋白)和asd(天冬氨酸β-半乳糖脱氢酶)基因双缺失猪霍乱沙门氏菌C500菌株的遗传稳定性。方法:将现有的无抗性抑制素重组表达质粒pXAIS转化入crp和asd基因双缺失猪霍乱沙门氏菌C500菌株(简称"空质粒株")中,得"含质粒株"。将"含质粒株"细菌在无选择压力条件下传代培养50代,利用酶切鉴定方法,分析"含质粒株"细菌中抑制素pXAIS质粒的稳定性;利用PCR方法扩增菌株("含质粒株"和"空质粒株")保守序列中invA基因,分析各代细菌的invA基因稳定性;通过比较传代培养后各代细菌的生长图型,分析"含质粒株"细菌传代后的生长规律。结果表明,"含质粒株"细菌连续传代50次后,仍能检出pXAIS质粒和invA基因,而且生长规律与"空质粒株"没有明显差异。说明含pXAIS质粒的猪霍乱沙门氏菌crp和asd基因双缺失株具有良好的遗传稳定性。

关键词: 减毒沙门氏菌, 抑制素(INH), 基因重组, 基因免疫