曼氏无针乌贼GT微卫星位点的筛选

曼氏无针乌贼GT微卫星位点的筛选

吴璋;张晓菊;蒋霞敏;薛良义;

宁波大学生命科学与生物工程学院;

出版日期:2011-03-26 发布日期:2011-03-26
基金资助:
浙江省重大专项(2007C12061);;国家农业成果转化项目(2009GB2C220415)

Published:2011-03-26 Online:2011-03-26

摘要/Abstract

摘要： 采用链霉亲和素包被的磁珠富集法筛选曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)微卫星位点。试验样品来自舟山六横岛,提取4个样品的DNA混合成DNA pool,用限制性内切酶Sau 3A I酶切。接上接头后构建基因组PCR文库,用生物素标记的(GT)15探针筛选。将筛选获得目的片段进行PCR扩增,连接pMD18-T载体,转入DH5α感受态大肠杆菌里,扩大培养后PCR筛选阳性克隆。总共选取278个克隆,对120个经过检测含有插入片段的克隆进行测序,发现102个克隆含有微卫星序列,阳性克隆比率为85%。除去重复测序和侧翼链不足的序列,可以设计引物的微卫星序列有64条。

吴璋;张晓菊;蒋霞敏;薛良义;. 曼氏无针乌贼GT微卫星位点的筛选[J]. .

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