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高表达精脒/精胺N~1-乙酰基转移酶对人肺癌A549细胞株生长的影响

柳蔚;韩钰;蔡富强;王艳林;   

  1. 三峡大学分子生物学研究所三峡大学医学院;
  • 出版日期:2011-03-26 发布日期:2011-03-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(30772590);;湖北省教育厅重点研究资助项目(D200713003)

  • Published:2011-03-26 Online:2011-03-26

摘要: 旨在研究人精脒/精胺N1-乙酰基转移酶(spermidine/spermine N1-acetyltransferase,SSAT)高表达对人肺癌A549细胞生长的影响。以pCR2.1-SSAT质粒为模板,PCR法扩增人SSAT基因并克隆至pcDNA3.1表达载体。重组质粒转染A549细胞后,RT-PCR法和Western blotting法筛选SSAT高表达的细胞株。MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。成功构建pcDNA3.1-SSAT重组质粒,用该质粒转染A549细胞后,筛选获得稳定高表达SSAT的细胞株。SSAT高表达导致细胞生长抑制,S期细胞减少和自发性凋亡细胞增多。结果显示,稳定高表达SSAT可在A549肺癌细胞中部分模拟多胺类似物类抗癌药物的药理活性,导致瘤细胞生长抑制和细胞凋亡。

关键词: SSAT, 真核表达, 肺癌细胞