适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定

适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定

李俊毅;李想;褚庆华;吕蓉;张舒亚;潘良文;黄新;朱水芳;

华东理工大学生物工程学院;上海出入境检验检疫局;中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所;

出版日期:2011-04-26 发布日期:2011-04-26
基金资助:
国家科技支撑项目(2008BAK41B01);;国家转基因重大专项(2009ZX08012-002B);; 上海市科委创新平台服务项目(10DZ2294102);; 国家“863”项目(2006AA10Z442);; 上海检验检疫局科研项目(HK003-2010)

Published:2011-04-26 Online:2011-04-26

摘要/Abstract

摘要： 针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73,其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段。对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT73高度特异于转基因油菜RT73品系。以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝。实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝。以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999。分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%。因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜RT73及其来源产品品系特异性检测。

关键词: PCR, RT73, 标准分子, 品系特异性检测, 实时荧光PCR

李俊毅;李想;褚庆华;吕蓉;张舒亚;潘良文;黄新;朱水芳;. 适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定[J]. .

[1]	余慧, 王静, 梁昕昕, 辛亚平, 周军, 赵会君. 宁夏枸杞铁镉响应基因的筛选及其功能验证[J]. 生物技术通报, 2023, 39(7): 195-205.
[2]	姚姿婷, 曹雪颖, 肖雪, 李瑞芳, 韦小妹, 邹承武, 朱桂宁. 火龙果溃疡病菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选[J]. 生物技术通报, 2023, 39(5): 92-102.
[3]	郭三保, 宋美玲, 李灵心, 尧子钊, 桂明明, 黄胜和. 斑地锦查尔酮合酶基因及启动子的克隆与分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(4): 148-156.
[4]	宋海娜, 吴心桐, 杨鲁豫, 耿喜宁, 张华敏, 宋小龙. 葱鳞葡萄孢菌诱导下韭菜RT-qPCR内参基因的筛选和验证[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 101-115.
[5]	李天顺, 李宸葳, 王佳, 朱龙佼, 许文涛. 功能核酸筛选过程中次级文库的有效制备[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 116-122.
[6]	余世洲, 曹领改, 王世泽, 刘勇, 边文杰, 任学良. 烟草种质基因分型核心SNP标记的开发[J]. 生物技术通报, 2023, 39(3): 89-100.
[7]	穆德添, 万凌云, 章瑶, 韦树根, 陆英, 付金娥, 田艺, 潘丽梅, 唐其. 钩藤管家基因筛选及生物碱合成相关基因的表达分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(2): 126-138.
[8]	李会杰, 董莲华, 陈桂芳, 刘思渊, 杨佳怡, 杨靖亚. 食品中椰毒假单胞菌微滴式数字PCR定量检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2023, 39(1): 127-136.
[9]	胡雪莹, 张越, 郭雅杰, 仇天雷, 高敏, 孙兴滨, 王旭明. 不同施肥处理农田土壤中噬菌体与细菌携带抗生素抗性基因的比较[J]. 生物技术通报, 2022, 38(9): 116-126.
[10]	程深伟, 张克强, 梁军锋, 刘福元, 郜兴亮, 杜连柱. 畜禽养殖粪污中典型致病菌的三重微滴式数字PCR定量检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2022, 38(9): 271-280.
[11]	曹英芳, 赵新, 刘双, 李瑞环, 刘娜, 徐石勇, 高芳瑞, 马卉, 兰青阔, 檀建新, 王永. 抗除草剂大豆GE-J12实时荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2022, 38(7): 146-152.
[12]	申恒, 刘思慧, 李跃, 李敬涛, 梁文星. 一种用于PCR的番茄DNA快速粗提方法[J]. 生物技术通报, 2022, 38(6): 74-80.
[13]	易芳, 来鹏程, 郑希鳌, 胡帅, 高燕丽. Kod DNA聚合酶的制备及纯化研究[J]. 生物技术通报, 2022, 38(5): 183-190.
[14]	孙宝箴, 全龙萍, 康慧, 姚玉新, 沈甜, 陈卫平, 杜远鹏, 高振. 基于跨反向剪接位点引物特异性检测circRNA的PCR方法[J]. 生物技术通报, 2022, 38(5): 279-285.
[15]	粟元, 朱龙佼, 曹继娟, 刘建龙, 许文涛. 基于大肠埃希菌 O157∶H7的荧光定量冻干检测试剂盒的研制[J]. 生物技术通报, 2022, 38(3): 264-275.

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