]*>","")" /> 小鼠beta-防御素2真核表达载体的构建及表达

• 论文 • 上一篇    下一篇

小鼠beta-防御素2真核表达载体的构建及表达

魏晓丽;温浩;金一帮;蒋中华;李明远;   

  1. 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室临床医学博士后流动站;新疆医科大学包虫病重点实验室;四川大学华西医学中心微生物教研室;
  • 出版日期:2011-05-26 发布日期:2011-05-26
  • 基金资助:
    自治区高校科研计划项目(XIEDU2009I20);;新疆包虫病基础医学重点实验室开放课题(XJDXO0202-2008-04)

  • Published:2011-05-26 Online:2011-05-26

摘要: 构建小鼠beta-防御素2(murie beta-defensin 2,mBD2)的真核表达载体pcDNA-mBD2,并观察其在真核细胞中的表达。从小鼠肝组织中提取mRNA通过逆转录聚合酶链反应扩增得到mBD2基因,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)获得pcDNA-mBD2;经酶切和测序鉴定构建正确,应用脂质体法转染siha细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内mBD2的表达。结果显示,构建了小鼠mBD2的真核表达载体,转染siha细胞培养并采用G418稳定筛选后,获得稳定转染细胞,收集并裂解转染细胞,蛋白免疫印迹法检测到转染细胞内mBD2的表达。成功构建了真核表达载体pcDNA-mBD2,为研究mBD2在宫颈癌发生发展过程中的作用及作用机制奠定基础。

关键词: beta-防御素2, 真核表达, 逆转录聚合酶链反应, 蛋白免疫印迹