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外源基因在烟草绿色组织中的高效表达研究

杨大伟;周焘;张锐;罗淑萍;郭三堆;   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程;新疆农业大学;
  • 出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30771371);;转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08005-004,2009ZX08005-004B,2008ZX08001-006)

  • Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要: 研究外源基因在受体绿色组织中的特异表达情况,分别构建由棉花PsbP启动子驱动的GUS基因及CP4 epsps基因的植物表达载体pBI121-P、pBI121-PE。农杆菌介导法转化到烟草中,获得20株转pBI121载体、40株转pBI121-P载体和32株转pBI121-PE载体的烟草阳性植株。组织化学染色分析表明,GhPsbP启动子驱动的GUS基因只在转基因烟草的叶片和茎中表达,在根中不表达;Real-time PCR分析表明,PsbP启动子驱动CP4 epsps基因在叶和茎中的表达量分别是根中的15倍和10倍;草甘膦抗性试验证明,PsbP启动子驱动的CP4 epsps基因在烟草叶及茎的绿色组织中的表达量足以忍受1%浓度草甘膦的毒害。证明GhPsbp启动子可以有效地驱动外源基因在烟草的绿色组织中高效特异的表达。

关键词: 绿色组织, GUS活性, Real-time PCR, 草甘膦抗性, 特异表达