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点突变对高加索乳杆菌醇脱氢酶酶活的影响

张伟;陈祈磊;朱宝泉;胡又佳;   

  1. 上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室;
  • 出版日期:2011-09-26 发布日期:2011-09-26
  • 基金资助:
    “重大新药创制”科技重大专项(2009ZC09301-007)

  • Published:2011-09-26 Online:2011-09-26

摘要: 从高加索乳杆菌基因组中克隆醇脱氢酶基因,构建重组表达菌后发现不同转化子具有不同的活性,测序结果表明在部分位点发生了点突变。结合生物信息学知识通过对醇脱氢酶结构与作用机理分析,认为在酶关键位点的突变对酶的活性影响较大,而非关键位点的突变对酶活的影响虽明显降低,但其突变的数目可能对酶活的影响呈现一定的累加效应。其中活性最高的重组菌表达了一个可将苯乙酮高选择对映还原成(S)-苯乙醇的醇脱氢酶,该研究结果为酶的定向进化研究提供了理论依据。

关键词: 高加索乳杆菌, 醇脱氢酶, 点突变