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野生濒危植物掌叶木的ISSR-PCR反应体系的建立

李雪萍;李在留;崔彬彬;贺春玲;彭健;杨婷;周振艳;   

  1. 河南科技大学林学院;广西大学林学院;保定学院生化系;
  • 出版日期:2011-09-26 发布日期:2011-09-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(31060053);;

  • Published:2011-09-26 Online:2011-09-26

摘要: 以野生濒危植物掌叶木的叶片为材料,通过单因子试验分别研究了模板DNA、退火温度、Taq DNA聚合酶用量、dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度等对ISSR-PCR反应的影响,找出各自的合适条件,通过各个因子的组合研究建立了适宜于掌叶木ISSR分析的扩增体系,即25μL的反应体系中含模板DNA约30 ng,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.8μmol/L,dNTP0.20 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U。该研究为利用ISSR分析掌叶木遗传多样性、进行掌叶木种质资源研究等奠定了良好的基础。

关键词: 掌叶木, ISSR, PCR, 优化