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人β-酪蛋白GAS基序荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定

员月明;李弘剑;   

  1. 暨南大学生命科学与技术学院;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(30770106)

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 构建人β-酪蛋白GAS基序荧光素酶报告基因表达载体。合成3个连续重复的人β-酪蛋白启动子中干扰素γ活化序列(gamma-activated sequence,GAS)并将其克隆至pGL3-Promoter荧光素酶报告基因载体。测序鉴定构建的载体,然后将其转染入人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblasts,HELF)中检测荧光素酶的表达活性。测序结果表明,3×GAS序列正确;双报告基因系统检测荧光素酶活性表明,构建的报告基因具有启动子活性。成功构建的人β-酪蛋白GAS基序荧光素酶报告基因表达载体,为进一步研究干扰素γ诱导的JAK-STAT信号通路提供了必要的试验材料。

关键词: β-酪蛋白, GAS基序, 荧光素酶, 报告基因